生化分析仪是用于检测肝功能、肾功能、血糖血脂、心肌酶谱等项目的医疗设备,那么生化仪的检测方式有哪些呢?
答案主要有:终点法、两点法、速率法(又称动力学法)。
1、两点终点法:
在被测物反应或指示反应尚未开始时,检测第一个吸光度,在反应到达终点时,再测出第二个吸光度,用此两点之差计算检测结果,称为两点终点法(two point end assay)。该法能有效地消除样本基质(样本空白)造成的干扰。
2、终点法:
被测物质通过反应过程完全转变为产物,即达到反应终点(实际是处于平衡状态),根据终点吸光度的大小求出被测物质的浓度,称为终点法。分析仪在反应终点连续测几个值进行处理后求出平均值,扣除空白后计算检测结果(适于反应简单、无干扰的单试剂检测项目)。反应应在规定时间内达到平衡,反应速度慢的原因有:酶量不足或酶的质量不好,或处于非佳反应条件。
3、速率法:
又称连续监测法、动力学法,是在测定酶活性时连续测定时间-吸光度曲线中线性期的吸光度值的变化率,并以此线性期单位时间的吸光度值ΔA/min计算检测结果。设定参数应与实际延迟期、线性期相符,否则应予修改;反应曲线斜率过低的原因:试剂底物浓度不足,辅酶(或指示酶)的酶量不足或质量不好,反应条件不佳。
4、固定时间法:
在时间-吸光度曲线上选择两个侧光点,此两点既非反应初始值也非终点值,用两点之差计算检测结果,称固定时间法(fixed time assay)。主要用于克服快速反应干扰物和慢反应干扰物对检测结果的影响。例如:苦味酸法测定肌酐,快反应(前30s)干扰物是:微生物、丙酮酸及乙酰乙酸等,慢反应(80s后)干扰物是:蛋白质。在时间-吸光度曲线的线性段,也可以采用连续监测法测定肌酐。
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